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耗材專區 | 肽段脫鹽耗材合集

更新時間:2024-12-27       點擊次數:1049

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簡介




2019年初,萊伯泰科從3M公司購得Empore™品牌所有資產和技術工藝。為了滿足生命科學領域的應用需求,我們基于Empore™固相萃取膜技術,開發出多款用于蛋白質組學領域樣品前處理的肽段脫鹽產品,主要有:Empore™固相萃取盤、Empore™固相萃取吸頭、Empore™固相萃取柱、Empore™固相萃取離心管、Empore™固相萃取96孔板等。每一款產品都有多種填料類型(C18、C8、SDB-XC、SDB-RPS、Anion、Cation等)、多種規格,可以根據要處理的樣品種類、樣品量多少、所需的通量多少等因素去選擇。這些耗材可以在LC-MS/MS分析之前純化多肽樣品或對多肽樣品做脫鹽處理。
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產品信息





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通用脫鹽方案



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A

試劑耗材

(1)C18 StageTips(貨號:98-0604-1001-3EA)
(2)Tips離心適配器(貨號:70-2019-1023-7)
(3)離心管:1.5 mL或2.0 mL,低吸附
(4)試劑:
活化液:100%甲醇
淋洗/平衡液:0.5%乙酸水溶液
洗脫液I:0.5%乙酸/60%乙腈水溶液(0.5%乙酸:60%乙腈:40%水)
洗脫液II:0.5%乙酸/80%乙腈水溶液(0.5%乙酸:80%乙腈:20%水)

B

實驗步驟

(1)樣品預處理:用200 µL淋洗/平衡液(0.5%乙酸水溶液)溶液多肽樣品,渦旋10~15 min,13000 r/min離心3~5 min;
(2)將固相萃取吸頭與適配器組裝在一起,然后整體放入2 mL離心管中,并在這一步做好標記;
(3)活化I:加載200 μL甲醇,4000 r/min離心1~2 min; 
(4)活化II:加載200 µL 80% ACN / 0.5% HAc, 4000 r/min離心1~2 min;
(5)棄去離心管中的液體;
(6)平衡:加載200µL0.5%乙酸水溶液, 4000 r/min離心1~2 min; 
(7)棄去離心管中的液體; 
(8)上樣:在吸頭中加載200 µL樣品,4000 r/min離心1~2 min,收集流出液并重新加載到吸頭上,再次離心,重復此步驟三次;根據含鹽量的不同,可調整離心時間(2~5 min);
(9)淋洗:加載200 µL0.5%乙酸水溶液,4000 r/min離心2~3 min,重復此步驟2~3次;同樣,根據含鹽量的不同,可調整離心時間(2~4 min);
(10)把吸頭和適配器放入新的離心管中,重新做好標記;
(11)洗脫I:加載200 µL 60% ACN / 0.5% HAc水溶液,4000 r/min離心2min;
(12)洗脫II: 加載200 µL 80% ACN / 0.5% HAc水溶液,4000 r/min離心2min,重復此步驟一次;
(13)棄去吸頭,在干冰上快速冷凍樣品(5~10 min),并進行真空干燥。



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